硝基呋喃類抗生素標(biāo)準(zhǔn)
硝基呋喃類抗生素及其代謝物在食品安全監(jiān)管中具有重要地位。各國和地區(qū)普遍要求其在動物源性食品中的殘留不得超過1.0μg/kg,甚至要求“不得檢出”。歐盟于1995年禁止使用此類抗生素,且后續(xù)出臺了一套嚴(yán)格的檢測方案,要求使用高靈敏度的方法來檢測食品 (主要是肉類、魚類和貝類)中是否存在此類抗生素。
我國對食品中硝基呋喃類的要求是最嚴(yán)格級別的禁令和殘留控制,在食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 《食品中獸藥最大殘留限量》(GB 31650-2021) 中,對所有硝基呋喃類藥物及其代謝物(AOZ, AMOZ, SEM, AHD)在所有可食動物組織(肌肉、脂肪、肝臟、腎臟等)以及禽蛋、牛奶中的限量規(guī)定均為“不得檢出”。并有配套的國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法來確?!安坏脵z出”標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行。
因此對于硝基呋喃類藥物及其代謝物的檢測和分析必須每個細(xì)節(jié)都謹(jǐn)慎嚴(yán)格。
從細(xì)節(jié)步驟入手優(yōu)化
在蘇黎世州官方食品監(jiān)管局(蘇黎世州立食品局)專注于動物性食品中獸藥殘留的分析團隊中,就食品中硝基呋喃的制備和分析方案中的濃縮步驟,運用不同的方式進行了驗證,結(jié)果及數(shù)據(jù)如下:
圖1:樣品制備及分析過程 |
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1 |
組織樣品均質(zhì)化 |
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酸水解以釋放組織結(jié)合代謝物 |
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用鄰硝基苯甲醛對代謝物進行衍生化以增加摩爾質(zhì)量并提高檢測靈敏度 |
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用乙酸乙酯進行液:液萃取 |
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蒸發(fā)至干 |
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用水重新懸浮 |
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用固相萃取進行凈化以消除干擾基質(zhì)元素,例如脂質(zhì) |
8 |
用氨甲醇洗脫 |
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蒸發(fā)至干 |
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在已知的少量適用于色譜分析的溶劑中重新懸浮 |
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通過超高效液相色譜法 [UHPLC]分離并用 MS/MS 分析 |
在樣品制備方法的蒸發(fā)部分傳統(tǒng)上依賴于使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,然而,它有許多操作缺陷。最大的缺點是旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器是一個單樣品系統(tǒng),需要連續(xù)監(jiān)測以控制過程并確保不發(fā)生起泡或暴沸。硝基呋喃樣品通常以批次多樣品的形式送達實驗室,如果使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器可以在有限的時間內(nèi)處理小批量樣品,那么處理大批量樣品時很快就會變得無法處理。因此,實驗人員針對吹掃式蒸發(fā)、渦式蒸發(fā)及真空離心式蒸發(fā)三種方式進行考察,結(jié)果如下:
三種蒸發(fā)方式結(jié)果表:
結(jié)論
傳統(tǒng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:
一批共20個樣品(參比溶液、樣品和加標(biāo)物)將需要大約1.5小時行第一次蒸發(fā)步驟,再進行2.5–3小時進行第二次蒸發(fā)??偣残枰ㄙM4–4.5小時,實驗人員必須時刻關(guān)注蒸發(fā)器并更換樣品。
真空離心濃縮儀:
對于同一批樣品,離心蒸發(fā)器的兩個蒸發(fā)步驟最多需要3個小時。在此期間,實驗人員可以完全實現(xiàn)0監(jiān)守。 離心蒸發(fā)器也可增加轉(zhuǎn)子總共提取 48 個硝基呋喃樣品。這48個樣品的蒸發(fā)時間(兩個步驟)比 20 個樣品的蒸發(fā)時間(兩個步驟)大約多1個小時。與使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器相比,這估計可以節(jié)省2–3 個小時。
總體而言,在使用英國Genevac公司生產(chǎn)的EZ-2 4.0系列真空離心濃縮儀估計可以為實驗室節(jié)省2-3 小時,且能夠在一天內(nèi)處理更大的樣品系列。 并且它顯著減少了污染(殘留)問題。避免假陽性結(jié)果影響一個樣品或整個批次樣品。且改設(shè)備的設(shè)計可應(yīng)用于實驗室的任何樣品或應(yīng)用的蒸發(fā)及濃縮步驟,對于樣品及方法進行科學(xué)的使用和管理。
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參考文獻
Kaufmann、K. Maden and S. Walker;An Improved Evaporative Sample Preparation Methodology for Determining Nitrofuran Antibiotic Residues in Foodstuffs ;Improved Antibiotic Residues Analysis
Genevac
ATS集團是德祥集團資深合作伙伴之一。英國Genevac公司成立于1990年,隸屬ATS SP Scientific旗下,一直專注于研究和生產(chǎn)各種離心蒸發(fā)濃縮設(shè)備,其產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、制藥、化學(xué)、分析等領(lǐng)域。
德祥科技
德祥科技有限公司成立于1992年,總部位于中國香港特別行政區(qū),分別在越南、廣州、上海、北京設(shè)立分公司。主要服務(wù)于大中華區(qū)和亞太地區(qū)——在亞太地區(qū)有27個辦事處和銷售網(wǎng)點,5個維修中心和2個樣機實驗室。
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